工业恒温机SPIA的核心是一条混合引物

      工业恒温机RCA的优势：

（1）高灵敏度，RCA有很强的扩增能力，线性RCA的效率可达到105倍，而指数RCA的效率可达到109倍，具有检测单拷贝的潜力。

（2）高序列特异性，可以区分单一位点的不同模式

（3）扩增产物经过磷酸化处理后可直接用来测序

（4）高通量，RCA可以在靶目标上形成闭合的环状序列，确保RCA产生的信号集中在一点，从而实现原位扩增和载片扩增。

工业恒温机RCA的不足：

（1）琐式探针常接近100bp,合成费用较高。

（2）信号检测时存在背景干扰问题

单引物等温扩增技术(SPIA)

工业恒温机SPIA的核心是一条混合引物及可以切割DNA/RNA杂合链中RNA部分的RNA酶，由3'端DNA部分和5'端RNA部分组成。在反应过程中，RNaseH不断降解引物区DNA/RNA双链中的RNA部分，暴露出模板上与引物RNA部分结合的位点，然后新引物结合上去进行链置换合成，经过RNA降解、新引物结合、链置换的循环过程，实现模板互补序列的快速扩增。

依赖解旋酶 DNA等温扩增技术 (HDA)

依赖解旋酶 DNA 等温扩增技术 (HDA) 是美国NEB 公司于 2004 年发明的一种新型核酸等温扩增技术。该技术模拟体内 DNA 复制的自然过程，利用解旋酶在恒温下解开 DNA 双链，再由 DNA 单链结合蛋白稳定已解开的单链为引物提供模板，然后在 DNA 聚合酶的作用下合成互补的双链，继而不断重复上述循环扩增过程，工业恒温机最终实现靶序列的指

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