一、区域划分
按功能可分为：实验区、准备区和办公区。
01
实验区
样品接收区：
接收提交临床检验的体液和石蜡样本，核对患者信息，并对接收样本进行登记和编号。 体液样本4℃保存并及时处理。
样品前处理区：
用于组织切片、脱蜡、染色及离心、涂片、血液、尿液、胸膜腹水等标本的染色。 在检测系统突变时，需要对组织学或细胞学样本进行病理质量控制。 目的是进一步明确病变组织或细胞是否与病理诊断相符； 评价肿瘤细胞比例是否符合检测要求； 确定肿瘤细胞的位置并富集肿瘤。 细胞，避免出血、坏死、间质细胞影响DNA质量。 由于该区域使用二甲苯等有毒有害物质，必须设置通风柜进行化学安全防护，并配备废液桶，对废弃的二甲苯等化学污染物进行统一回收处理。
试剂暂存及配制区：
试剂暂存区应配备4℃和-20℃以下的冰箱，根据试剂的贮存条件分别存放，并记录使用情况。 配制区根据反应体系配制各种反应试剂。
制样区：
石蜡样本癌组织富集、样本消化、DNA和RNA提取及OD值测定。 区域设置外放式二级生物安全柜，减少实验过程中产生的有害气溶胶对实验人员和环境的危害。 特别是用于检测种系突变的血液样本和携带各种病毒的样本，需要在生物安全柜中操作酒窖恒温恒湿机，以确保生物安全防护。 如果计划开展超灵敏方法检测血液中微量循环DNA的项目，必须独立划分此区域进行微量循环DNA的提取，防止微量循环DNA被污染。其他样品中的高浓度 DNA。
核酸片段化区域：
样品核酸的片段化。 该区域可能产生核酸气溶胶，属于核酸污染区域，需要进行相应的防护清洁处理。
区域的PCR扩增：
第一次 PCR 扩增。 PCR过程中会产生大量核酸短片段恒温恒湿空调机，是核酸气溶胶的重要来源。 该区域为核酸污染区域。 必须避免在 PCR 反应过程中爆管和 PCR 反应结束后打开盖子。 一旦发生，要做好记录，及时清理核酸污染，监测空气中是否有气溶胶。
产品分析领域：
对PCR产物或核酸片段进行电泳检测。 核酸断裂分为机械断裂和酶消化断裂。 机械碎裂后的产物需要进行电泳检测，以评价核酸的碎裂状态。 该区域存在对核酸片段化或PCR扩增后的产物进行开盖操作，也是核酸气溶胶的重要来源地恒温恒湿实验室设计，属于核酸污染区域。
净化第一区：
第一次PCR产物纯化、第一次杂交、第一次捕获、第二次杂交、第二次捕获和捕获样品纯化。 该区域存在对PCR扩增后产物进行开盖操作，是核酸气溶胶的重要来源，属于核酸污染区域。
第二区域的PCR扩增：
第二次PCR扩增。 注意事项同PCR扩增。
第二区净化：
二次PCR产物纯化及文库检测。 注意事项同净化区。
测序区域：
放置用于机上排序的排序器。 该区域本身不产生核酸气溶胶，但需要采取防止气溶胶污染的措施，属于核酸半污染区域。
数据分析区：
数据处理和分析、结果解释和报告打印。 该区域本身不产生核酸气溶胶，属于核酸半污染区。 另外，如果建立荧光原位杂交检测平台，还需要独立设置以下两个区域：
荧光原位杂交区：该区主要用于低渗、预固定、固定、滴加、老化、消化、洗涤、变性、杂交、复洗。 该区域处理可能携带生物危害的血液和骨髓、尿液或其他体液必须配备生物安全柜或通风柜，以防止生物污染物对工作人员造成伤害。 荧光原位杂交观察区：避光，安装荧光显微镜，观察结果。
2个
实验准备区
高温灭菌室：
配备高压蒸汽灭菌器和高温烘箱，设备功率大，配电需单独线路。 由于高压蒸汽设备，该区域空气交换12次/小时。
危险品仓库：
该区域应远离实验室和办公区域，安全出口应畅通无阻。 所有危险化学品必须存放在铁柜中。 对有腐蚀性、易燃易爆的试剂，应采取防腐防爆和通风措施恒温恒湿机品牌，铁柜应安装挂锁，钥匙应由专人保管。 危险品仓库应配备灭火器和砂桶，以防火灾。
一般仓库：
收纳移液枪头、离心管等，贴近墙壁安装搁板，有序摆放各类耗材，方便取用。
试剂储藏室：
试剂保存分为常温保存（18℃-26℃）、冷藏保存（2℃-8℃）和冷冻保存（-20℃以下）。 试剂储藏间的冰箱、冰柜热量大，需要安装通风系统，注意环境温度的控制。 冰箱和冰柜应配备带有警告的温度监控系统。 当温度异常时，会发出警报，工作人员可以及时处理，避免试剂失效。
3个
办公区
主要用于实验人员的工作、学习和休息。 为洁净区，需远离生物污染区和危险品仓库。 对于步骤多、流程长的检测平台，为防止污染，实验室功能区设计应尽可能细分。 如果实验室拥有多个检测技术平台，可根据所用仪器的功能，对功能区进行适当组合。 笔者认为，实验室污染分为生物污染和核酸污染。 生物污染主要在体液样本处理区域，而核酸污染主要在核酸提取、扩增和分析区域。 据此，实验室应根据生物污染对象分为生物污染区、生物半污染区和生物洁净区。 实验室也可分为核酸污染区、核酸半污染区和核酸洁净区。 区域。
2.气流方向
PCR实验室易发生短核酸片段形成的气溶胶污染。 气溶胶是由粒径为0.001μm～100μm的固体或液体微小颗粒悬浮在气体介质中形成的一种相对稳定的分散体系。 一旦出现核酸气溶胶污染，将直接导致核酸检测结果出现误差，而且这种污染很难去除。 为防止核酸气溶胶污染，各功能区需安装独立的通风系统，密闭恒温恒湿实验室设计，不允许交叉通风，避免交叉污染。
实验室通风时，气流应上下送风。 送风口和排风口的布置应便于室内污染空气的排出。 生物安全柜操作面附近或其他产生气溶胶的地方应无气流。 设置出风口。 各区域换气12次/h～16次/h。 实验室也可采用开窗自然通风，但需配备防虫网和防节肢动物设施。 有条件的实验室可安装负压装置。 功能区内气压（负压）与室外大气压的压差≥30Pa，与相邻区域的气压差（负压）≥10Pa。
3.缓冲区
实验功能区需要设置缓冲间来控制空气的流动。 缓冲间的门具有联锁功能，不能同时打开。 缓冲室内设置洗手装置、衣架或不带手动开关的衣柜，方便实验者进出更换实验服。 不同功能区的缓冲区之间应穿不同颜色的工作服，工作人员离开缓冲区时不得将工作服带出。
4.应急设置
样品前处理区和制样区应设置紧急冲淋洗眼器和紧急冲淋装置，以方便应急处理。 实验室应配备火灾自动报警装置和应急照明装置。 安全通道应有消防疏散标志，并配备适用的应急设备，如消防设备、事故处理设备、急救设备等。
5、温湿度控制
放置大型精密仪器的测序区、PCR扩增区1、2区应恒温恒湿，相对湿度控制在30%～70%。 温度应控制在18℃至26℃范围内，2小时内温度波动应小于2℃，避免环境因素影响实验结果。
6.二级生物安全实验室
二级生物安全实验室用电负荷不应低于二级。 大型重要精密设备需要单独的配电线路，并配备不间断电源（UPS）以保证供电电压的稳定。 此外，各功能区需配备定时紫外线灯。 紫外线灯发射波长为254nm的紫外线，可将核酸长片段打断，既防止生物污染，又防止核酸污染。 安装在抛光天花板上的固定式紫外灯与地面的距离<2.1m，紫外灯的数量根据每个区域的空间来确定，以保证照射剂量>·s/cm。
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