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行业动态

恒温恒湿机组现就这些等温扩增技术的原理特点及应用

时间:2022-06-28 10:15:47 作者:恒温恒湿机 点击:

 

近年来,随着分子生物学技术的迅速发展,基于核酸检测的诊断方法已大量建立并广泛应用于人类疾病的实验室检测中,恒温恒湿机组恒温扩增技术便是其中一种,与其他的核酸扩增技术相比,恒温扩增有快速、高效、特异的优点且无需专用的设备,所以它一经出现就被许多学者认为是一种有可能与PCR媲美的检测方法。

当前常见的等温扩增技术有环介导等温扩增技术、链替代等温扩增技术、滚环等温扩增技术、依赖解旋酶等温扩增技术、依赖核酸序列等温扩增技术、单引物等温扩增技术和核酸快速等温检测放大等技术。

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为了更好地有选择地开发利用这方面技术,恒温恒湿机组现就这些等温扩增技术的原理、特点及应用进行简要总结。

环介导等温扩增其扩增原理是基于DNA65℃左右处于动态平衡状态,恒温恒湿机组任何一个引物向双链DNA的互补部位进行碱基配对延伸时,另一条链就会解离,变成单链,在此前提下利用4种不同的特异性引物识别靶基因的6个特定区域,在链置换型DNA聚合酶的作用下,恒温恒湿机组以外侧引物区段的3`末端末端为起点,与模板DNA互补序列配对,启动链置换DNA合成。

LAMP的优势:

1)扩增效率高,能够在1h内有效的扩增1-10拷贝的目的基因,扩增效率是普通PCR10-100

2)反应时间短,特异性强,不需要特殊的设备

LAMP的劣势:

1)对引物的要求特别高

2)扩增产物不能用于克隆测序,只能用于判断

3)由于其敏感性强,特别容易形成气溶胶,造成假阳性影响检测结果

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